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如何选择合适的重组蛋白

如何选择合适的重组蛋白

  • 分类:行业资讯
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  • 发布时间:2022-01-14 10:29
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【概要描述】  选择合适的重组蛋白产品对获得正确的实验结果非常重要。可以从以下几点中进行选择:

如何选择合适的重组蛋白

【概要描述】  选择合适的重组蛋白产品对获得正确的实验结果非常重要。可以从以下几点中进行选择:

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  选择合适的重组蛋白产品对获得正确的实验结果非常重要。可以从以下几点中进行选择:

  1.蛋白来源

  一些蛋白需要一系列翻译后修饰才能成为活性成熟蛋白质。细菌不能提供这样的修饰,但哺乳动物细胞可以。因此,我们在购买时要注意蛋白质的来源。

  当然,除了上面提到的两种表达系统之外,还有酵母和昆虫的表达系统,各有优缺点,所以一定要注意选择重组蛋白。

  优势

  繁殖快,成本低,产量高;基因表达的遗传背景和调控机制明确;易于大规模栽培,成本低。

  使用方便,表达水平高,纯化方便,经过一定的翻译后处理进行糖基化修饰,操作简单,适合大规模生产;它可以诱导表达或分泌表达,产品易于纯化。

  产量高,翻译后处理与哺乳动物相似;它对一些有毒或难以表达的蛋白质有优势;无内毒素污染。

  完美的翻译后处理,活性接近天然蛋白质。

  缺点

  蛋白质通常是包涵体,很难纯化。无糖糖基化(分泌蛋白,细胞膜上不可利用的蛋白),生物活性不确定;无翻译后修饰,内毒素含量高。

  有时会出现蛋白质切割问题;糖基化不能满足要求。

  蛋白质活性不如哺乳动物;它适用于表达位于细胞中的真核蛋白质,如激酶。

  周期长,技术要求高;表达量低。

  2.物种和属的起源

  蛋白常见的物种来源有人源、小鼠源和大鼠源等。一般来说,不同种属之间的蛋白质同源性在80%以上可以视为交叉活性,可以推荐使用。

  3.生物活性和稳定性

  蛋白质的纯度、内毒素水平和批次间的稳定性将直接影响实验结果。所以优质蛋白产品会严格监控这个环节,提供详细的数据。同时,还应考虑蛋白质产品的生物活性。

  一般来说,只要记住以下五点:

  大多数人类细胞因子在小鼠细胞上是活跃的。

  许多小鼠细胞因子对人细胞也有活性,但活性低于相应的人细胞因子。

  一些人类细胞因子(如白细胞介素-7)在小鼠细胞中显示出比小鼠细胞因子更高的活性。

  干扰素、粒细胞集落刺激因子、白细胞介素-3和白细胞介素-4是物种特异性的,对非人细胞几乎没有活性。

  成纤维细胞生长因子和神经营养因子高度保守,在其他动物细胞中也能表现出良好的活性。


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