色谱柱的注意事项
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- 发布时间：2021-08-02 15:43
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色谱柱的正确使用和维护非常重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短其使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，维持色谱柱需要注意以下问题。
色谱柱的注意事项
色谱柱的正确使用和维护非常重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短其使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，维持色谱柱需要注意以下问题。
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色谱柱的正确使用和维护非常重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短其使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，维持色谱柱需要注意以下问题。
①避免压力和温度的突然变化以及任何机械振动。温度的突然变化或色谱柱从高处坠落都会影响塔内的填充条件;柱压的突然升高或降低也会对柱内填料产生冲击，因此应缓慢调节流速，并在阀门处进样，在阀进样时阀的转动不能过缓。
②溶剂的组成要逐渐变化，尤其是反相色谱，不能直接从有机溶剂变成全水，反之亦然。
③一般来说，色谱柱不能反冲。只有当制造商表明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则，反冲会迅速降低柱效。
④选择合适的流动相(尤其是pH值)，避免破坏固定相。有时可以在进样器前面连接一个预柱。分析柱为键合硅胶时，预柱为硅胶，使流动相在进入分析柱前可以用硅胶“饱和”，防止分析柱中的硅胶基质溶解。
⑤为避免基质复杂的样品，特别是生物样品直接进柱，需要对样品进行预处理或在进样器和色谱柱之间连接保护柱。保护柱通常是填充有类似固定相的短柱，保护柱可以而且应该经常更换。
⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱以除去残留在柱中的杂质。清洗时，流路系统中流动相的更换应逐渐过渡到可混溶的溶剂，每个流动相的体积应为柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。
⑦存放色谱柱时，用乙腈或甲醇填充色谱柱，拧紧色谱柱接头，防止溶剂蒸发干燥。切勿将缓冲溶液留在色谱柱中过夜或更长时间。
⑧色谱柱 在使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结过滤器堵塞。此时应更换或取出过滤器进行清洗;二是大分子进入柱内，柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形，柱头可能塌陷，死体积增加。
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