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亲和层析介绍和应用

亲和层析介绍和应用

  • 分类:行业资讯
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  • 发布时间:2022-12-20 11:00
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【概要描述】  亲和层析纯化过程简单、快速、分离效率高。对分离含量低、不稳定的活性物质特别有效。但是,该方法必须针对某一分离对象制备特定的配体并寻求色谱稳定的条件。

亲和层析介绍和应用

【概要描述】  亲和层析纯化过程简单、快速、分离效率高。对分离含量低、不稳定的活性物质特别有效。但是,该方法必须针对某一分离对象制备特定的配体并寻求色谱稳定的条件。

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  亲和层析是利用待分离物质与其特定配体之间的特异性亲和力来达到分离目的的一种特殊的色谱技术。下面了解下亲和层析介绍和应用。

  具有特异性亲和力的生物分子对主要包括:抗原和抗体、DNA和互补DNA或RNA、酶及其底物或竞争性抑制剂、激素(或药物)及其受体、维生素及其特异性结合蛋白、糖蛋白及其相应的植物凝集素、等一对亲和分子中的一个与不溶性支持物共价连接,作为固定相吸附剂。当含有混合组分的样品通过该固定相时,只有与固定相分子具有特定亲和力的物质才能被固定相吸附结合,其他不具有亲和力的无关组分随流动相流出。然后,改变移动组件以洗脱结合的亲和力。亲和层析中使用的载体称为基质,共价结合在基质上的化合物称为配体。

  亲和层析纯化过程简单、快速、分离效率高。对分离含量低、不稳定的活性物质特别有效。但是,该方法必须针对某一分离对象制备特定的配体并寻求色谱稳定的条件。

  亲和层析可以简单、快速、高效地从混合蛋白溶液中分离纯化目的蛋白。亲和层析技术已成为广泛应用的蛋白质分离技术,也可针对客户提供的抗体或抗血清制备亲和层析柱。

  一、亲和层析可用于:

  1.生物大分子的纯化;

  2.稀溶液的浓缩;

  3.不稳定蛋白的储存;

  4.去除纯化分子中的残留污染物;

  5.免疫吸附法吸附纯化无互补配体的生物大分子:

  6.分离核酸是亲和层析应用的一个重要方面。

  二、亲和层析特殊应用:

  亲和层析用途广泛,可用于从细胞提取物中分离和纯化核酸和蛋白质,以及从血浆中分离抗体。亲和层析常用于分离重组蛋白。通过基因修饰,在蛋白质中加入一些人工性质,使蛋白质可以选择性地与配体结合,从而达到分离的目的。亲和层析的另一个重要用途是从血浆中分离抗体。


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