亲和层析法纯化抗体技术指南
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- 来源:
- 发布时间:2022-09-14 10:34
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抗体在无数应用中仍然非常有用,包括基础研究、成像、靶向递送、色谱、诊断和治疗。在生产阶段,抗体一般存在于复杂的细胞中,其应用大多需要纯化后才能使用。在众多不同的技术中,亲和层析是纯化抗体有选择性、快速、简便的纯化方法。
亲和层析法纯化抗体技术指南
抗体在无数应用中仍然非常有用,包括基础研究、成像、靶向递送、色谱、诊断和治疗。在生产阶段,抗体一般存在于复杂的细胞中,其应用大多需要纯化后才能使用。在众多不同的技术中,亲和层析是纯化抗体有选择性、快速、简便的纯化方法。
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抗体在无数应用中仍然非常有用,包括基础研究、成像、靶向递送、色谱、诊断和治疗。在生产阶段,抗体一般存在于复杂的细胞中,其应用大多需要纯化后才能使用。在众多不同的技术中,亲和层析是纯化抗体有选择性、快速、简便的纯化方法。
亲和层析的原理是什么
亲和层析是液相色谱中选择性好、用途广的技术,依赖于蛋白质与其配体的可逆定点结合,如激素及其受体、酶及其底物、抗体和抗原等。利用这种特殊的相互作用,相互作用物质的一个相,称为亲和配体,可以固定在色谱柱上作为亲和层析的固定相。通过亲和配体的选择性吸附,从复合组分中洗脱出目标蛋白。洗脱后,色谱柱将为下一个样品进行再生。
亲和层析是常用的生物物质分离方法之一,具有特异性高、速度快、操作简单等特点。成熟的技术模型包括抗体或抗体片段、His标签蛋白、GST标签蛋白、蛋白酶、凝血因子等的分离纯化。
亲和层析成分有哪些
亲和层析可以选择各种不同类型的结合物(配体)和固相支持物(底物)。通过优化不同的性质,例如特异性、选择性、可重复性、交联化学、成本效益等。亲和层析可用于大规模纯化抗体,以获得所需的产率和纯度。多年来,人们一直在努力寻找和制造高质量的培养基和配体,并辅以优化有效的亲和层析方法,以经济有效的方式生产越来越多的高纯度靶抗体。
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